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免疫組化,其實方法和操作都不是很難,關鍵是結果出現(xiàn)異常時如容易出現(xiàn)組織脫片該如何去解決?我們先了解一下組織脫片的原因有哪些?
1.空白片少,經(jīng)不起反復折騰;
2.回顧性研究中不可能使用新鮮的切片組織;
3.某些單位先前并沒有使用防脫載玻片保留組織標本等。
針對這些問題,可以嘗試如下改良方法。
針對這些問題,可以嘗試如下改良方法。
如上所說,先采用酶修復,后熱修復,一般熱修復是直接置于相應的修復液中煮沸,期間還有可能使用高壓鍋。
1. 酶修復,各自抗原特性選擇,有些時候酶修復的時間是極其難把握的。時間太長,消化過頭容易脫片;時間太短,抗原暴露不充分,這些都影響實驗結果。建議稀釋濃度,延長修復時間。
2. 熱修復,理論基礎:抗原修復時僅需要組織與修復液接觸,且只要薄薄的一層就能反應。
改良一:敞開高壓鍋蓋,置一鐵架于修復液面,其上放置玻片,玻片上滴加修復液體(鐵架高度以沸騰修復液不會觸及玻片為妥)。為了防止玻片上的修復液揮發(fā),可在滴加修復液后蓋上蓋玻片,提供熱源使修復液保持沸騰狀態(tài),使用熱蒸汽加熱。
優(yōu)點:避免了改良一中可能無法達到所需修復溫度的問題,可以放入高壓鍋中。
缺點:片子變成平鋪展開,一次所能做的片子數(shù)目減少。
新鄉(xiāng)市維克科教儀器有限公司主營產(chǎn)品包括:組胚病理切片、顯微鏡切片、彩色切片套裝、,臘葉浸制標本,顯微鏡生物玻片等科教產(chǎn)品。產(chǎn)品因其制作精良,質量卓越,在業(yè)界備受贊譽,詳情請咨詢:0373-5128357